Juana de Austria (1535-1573) fue la fundadora del Monasterio de las Descalzas Reales. Hija del emperador Carlos V y de Isabel de Portugal, fue princesa de Portugal a raíz de su matrimonio con el príncipe don Juan Manuel, hijo de Catalina de Austria y de Juan III de Avís.
En su amplia galería de retratos que, en buena medida acabó en las Descalzas Reales, su imagen aparecía hasta diez veces efigiada en "pinturas de pincel". En este caso, el autor de la obra es Alonso Sánchez Coello, posiblemente con intervención del taller, y se fecha hacia 1566. En la pintura aparece como viuda, con saya negra, toca y puntillas blancas y acariciando, como era frecuente en retratos de la época, un camafeo blanco con la imagen de su padre el emperador.
